Come i ricercatori trasformano i batteri in mini-fabbriche di cellulosa

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Cellulosa batterica allo stato umido. (Immagine: Peter Rüegg / ETH Zurigo)
Cellulosa batterica allo stato umido. (Immagine: Peter Rüegg / ETH Zurigo)
I ricercatori hanno modificato alcuni batteri con la luce UV in modo che producano più cellulosa. La base è un nuovo approccio con cui i ricercatori generano migliaia di varianti batteriche e selezionano quelle che si sono sviluppate in modo più produttivo.

I batteri producono materiali di interesse per l’uomo, come la cellulosa, la seta o i minerali. Il vantaggio della produzione batterica è che è sostenibile e avviene a temperatura ambiente e in acqua. Uno svantaggio è che i batteri impiegano molto tempo e producono solo piccole quantità, troppo poche per essere utilizzate a livello industriale, motivo per cui i ricercatori stanno cercando da tempo di trasformare i microrganismi in mini-fabbriche viventi in grado di produrre più rapidamente quantità maggiori di un prodotto desiderato. Ciò richiede interventi mirati sul materiale genetico o l’allevamento dei ceppi batterici più adatti.

Un nuovo approccio è stato presentato dal gruppo di ricerca guidato da André Studart, professore di materiali complessi al Politecnico di Zurigo, utilizzando l’esempio del batterio produttore di cellulosa dal nome complicato Komagataeibacter sucrofermentans. Applicando i principi dell’evoluzione per selezione naturale al loro metodo, gli scienziati possono generare decine di migliaia di varianti del batterio in un tempo molto breve e selezionare quelle che producono più cellulosa.

K. sucrofermentans produce naturalmente cellulosa di elevata purezza, un materiale molto richiesto per applicazioni biomediche, per la produzione di materiale da imballaggio o di tessuti, tra le altre cose. Questa cellulosa favorisce la guarigione delle ferite e previene le infezioni, ad esempio. "Ma i batteri crescono lentamente e producono solo quantità limitate di materiale. Dovevamo quindi trovare un modo per aumentare la produzione", spiega Julie Laurent, dottoranda del gruppo di Studart e prima autrice di uno studio appena pubblicato sulla rivista scientifica PNAS.

È riuscita a farlo con l’approccio da lei sviluppato: Alcune varianti di K. sucrofermentans producono fino al settanta per cento di cellulosa in più rispetto alla forma originale.

Accelerare l’evoluzione con la luce UV

In primo luogo, la ricercatrice sui materiali ha creato nuove varianti del batterio originale, il cosiddetto wild type. Per farlo, ha irradiato le cellule batteriche con luce UV-C. La luce UV danneggia il DNA batterico in punti casuali. Julie Laurent ha poi lasciato i batteri a riposo nella camera oscura, impedendo loro di riparare il danno al DNA. Questo provoca mutazioni.

Ha quindi incapsulato ogni singola cellula batterica in una minuscola goccia di soluzione nutritiva utilizzando un apparecchio in miniatura e ha lasciato che le cellule producessero cellulosa per un po’ di tempo. Dopo il periodo di incubazione, ha usato la microscopia a fluorescenza per analizzare quali cellule producevano molta cellulosa e quali ne producevano poca o nessuna.


Utilizzando un sistema di selezione sviluppato dal chimico Andrew DeMello, il team di Studart ha selezionato automaticamente le cellule che si erano sviluppate come migliori produttrici e che avevano prodotto una quantità particolarmente elevata di cellulosa. Il sistema di selezione funziona in modo completamente automatico e molto rapido. In soli dieci minuti, è in grado di scansionare mezzo milione di gocce con un laser e di selezionare quelle che contengono più cellulosa. Alla fine ne rimangono solo quattro, che producono dal 50 al 70% di cellulosa in più rispetto al tipo selvatico.

Le cellule avanzate di K. sucrofermentans sono in grado di produrre tappeti di cellulosa in recipienti di reazione nello strato di confine tra aria e acqua. Un tappeto di cellulosa in un recipiente di questo tipo pesa naturalmente tra i due e i tre milligrammi ed è spesso 1,5 millimetri. I tappetini delle varianti ulteriormente sviluppate sono quasi due volte più pesanti e spessi.

Julie Laurent e i suoi colleghi hanno analizzato queste quattro varianti anche dal punto di vista genetico per scoprire quali geni erano stati alterati dalla luce UV-C e come questi cambiamenti portavano alla sovrapproduzione di cellulosa. Tutte e quattro le varianti presentavano la stessa mutazione nello stesso gene. Questo gene è il progetto di una proteasi, un enzima che divide le proteine. Con grande sorpresa dei ricercatori sui materiali, tuttavia, i geni che controllano direttamente la produzione di cellulosa non erano alterati. "Sospettiamo che questa proteasi degradi le proteine che regolano la produzione di cellulosa. Senza questa regolazione, la cellula non può più arrestare il processo", spiega il ricercatore.

Brevetti in corso di registrazione

La nuova piattaforma è versatile e può essere trasferita a batteri che producono altri materiali. In origine, tali piattaforme erano state sviluppate per creare batteri che producono determinate proteine o enzimi. "Siamo i primi a utilizzare una piattaforma di questo tipo per migliorare la produzione di materiali non proteici", afferma il professore dell’ETH André Studart. "Per me questo lavoro è una pietra miliare".

I ricercatori hanno presentato una domanda di brevetto sia per la piattaforma che per le varianti batteriche mutate.

I ricercatori intendono ora collaborare con aziende che già producono cellulosa batterica per testare i nuovi microrganismi in condizioni industriali reali.

Riferimento alla letteratura

Laurent JM, Jain A, Kan A, Steinacher M, Enrriquez Casimiro N, Stavrakis S, deMello AJ, Studart AR: Directed evolution of material-producing microorganisms. PNAS, 23 luglio 2024, 121 (31) e2403585121, doi: 10.1073/pnas.2403585121
Peter Rüegg